上海传秋生物科技有限公司
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技术资料/正文
HUVEC人脐静脉内皮细胞,培养时注意事项~~~
4896 人阅读发布时间：2020-05-14 14:35
HUVEC（人脐静脉内皮细胞）
细胞来源：原代细胞
规格 ：1x10^6个细胞/T25
培养条件：ECM培养基（货号：Sciencell,1001）
特性：贴壁（上皮细胞样）
注意事项
细胞来源：原代细胞
规格 ：1x10^6个细胞/T25
培养条件：ECM培养基（货号：Sciencell,1001）
特性：贴壁（上皮细胞样）
注意事项
1.该细胞对培养基要求较高，请使用推荐培养基。
2.培养基分为4度保存的基础培养基和—20度保存的添加物。推荐对添加物溶解后进行分装，使用前按说明书进行配置完全培养基，每次配置的完全培养基应尽量在2周以内用完，并尽量避光且在室温下放置太长时间。
3.该细胞对消化较为敏感，消化时应避免消化过度，注意观察细胞形态，细胞刚刚消化完毕就轻轻吹打下来。
4.该细胞培养时会尝试一些细胞碎片。
传代：
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-2小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；
2.待细胞长至80-90%时，需要对其进行传代，推荐传代比例为1:2至1:4 ；
3.传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心5min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
冻存条件：
无血清细胞冻存液货号：（H-W-100），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。
常见问题处理方法：
1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。
2.收到细胞后尽快更换为含新鲜培养基，不可使用瓶内旧培养基
3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。
实验室常备细胞株如下：
NCI-H23 人非小细胞肺癌细胞
NCI-H358 人非小细胞肺癌细胞
NCI-H446 [H446] 人非小细胞肺癌细胞
NCI-H520 人肺鳞癌细胞
NCI-H524 人非小细胞肺癌细胞
NCI-H838 人非小细胞肺癌细胞
NCTC 1469 小鼠正常肝细胞
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 小鼠骨髓瘤细胞
P3X63Ag8.653 小鼠骨髓瘤细胞
PLC/PRF/5 人肝癌亚力山大细胞
RKO-E6 人结肠癌转基因细胞
RT4 人膀胱移行细胞乳头瘤细胞
RTE 大鼠气管上皮细胞
SK-MEL-1 人肝癌细胞
SK-N-BE(2) 人神经母细胞瘤细胞
SK-NEP-1 人肾母细胞瘤细胞
Sp2/0-Ag14 小鼠骨髓瘤细胞
SW 1353 人软骨肉瘤细胞
SW 1990 人胰腺癌细胞
SW 780 [SW-780, SW780] 人膀胱移行细胞癌
SW 982 [SW-982, SW982] 人滑膜肉瘤细胞
SW-13 人肾上腺皮质小细胞癌细胞
L5178Y TK+/- clone(3.7.2C) 小鼠淋巴瘤细胞
TM4 正常小鼠睾丸Sertoli细胞
TT 人甲状腺导管癌细胞
U-118 MG 人脑星形胶质母细胞瘤
UMR-106 大鼠骨肉瘤细胞
UM-UC-3 人膀胱移行细胞癌
WPMY-1 人正常前列腺基质永生化细胞
293T/17 人胚肾细胞
SV40 MES 13 小鼠肾小球系膜细胞
Super Tube 狗肾细胞
SNU-1 人胃癌细胞
B95-8 绒猴EB病毒转化的白细胞
BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纤维细胞
CCC-SMC-1 兔主动脉平滑肌细胞
PC-12(低分化) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）
PC-12(高分化) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（高分化）
PED 猪内皮细胞
Ramos [RA 1] 人B淋巴细胞瘤细胞
Reh 人急性非B非T淋巴细胞白血病
CHO/dhFr- [CHO-DXB11] 仓鼠卵巢细胞（二氢叶酸还原酶缺陷）
Mv.1.Lu [NBL-7; Mv1Lu] 貂肺上皮细胞
CV-1 非洲绿猴肾细胞
HAKATA@细胞资源库来源ATCC、DSMZ、 JCRB、 Lonza、 中科院、国家干细胞资源库等，前后引进千余多株细胞种子;坚持细胞来源真实可靠，细胞产品代数靠前，活力优佳，人源细胞提供权威机构的STR鉴定报告。
如有需要，随时联系我们！www.chuanqiubio,com
传代：
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-2小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；
2.待细胞长至80-90%时，需要对其进行传代，推荐传代比例为1:2至1:4 ；
3.传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心5min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
冻存条件：
无血清细胞冻存液货号：（H-W-100），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。
常见问题处理方法：
1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。
2.收到细胞后尽快更换为含新鲜培养基，不可使用瓶内旧培养基
3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。
实验室常备细胞株如下：
NCI-H23 人非小细胞肺癌细胞
NCI-H358 人非小细胞肺癌细胞
NCI-H446 [H446] 人非小细胞肺癌细胞
NCI-H520 人肺鳞癌细胞
NCI-H524 人非小细胞肺癌细胞
NCI-H838 人非小细胞肺癌细胞
NCTC 1469 小鼠正常肝细胞
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 小鼠骨髓瘤细胞
P3X63Ag8.653 小鼠骨髓瘤细胞
PLC/PRF/5 人肝癌亚力山大细胞
RKO-E6 人结肠癌转基因细胞
RT4 人膀胱移行细胞乳头瘤细胞
RTE 大鼠气管上皮细胞
SK-MEL-1 人肝癌细胞
SK-N-BE(2) 人神经母细胞瘤细胞
SK-NEP-1 人肾母细胞瘤细胞
Sp2/0-Ag14 小鼠骨髓瘤细胞
SW 1353 人软骨肉瘤细胞
SW 1990 人胰腺癌细胞
SW 780 [SW-780, SW780] 人膀胱移行细胞癌
SW 982 [SW-982, SW982] 人滑膜肉瘤细胞
SW-13 人肾上腺皮质小细胞癌细胞
L5178Y TK+/- clone(3.7.2C) 小鼠淋巴瘤细胞
TM4 正常小鼠睾丸Sertoli细胞
TT 人甲状腺导管癌细胞
U-118 MG 人脑星形胶质母细胞瘤
UMR-106 大鼠骨肉瘤细胞
UM-UC-3 人膀胱移行细胞癌
WPMY-1 人正常前列腺基质永生化细胞
293T/17 人胚肾细胞
SV40 MES 13 小鼠肾小球系膜细胞
Super Tube 狗肾细胞
SNU-1 人胃癌细胞
B95-8 绒猴EB病毒转化的白细胞
BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纤维细胞
CCC-SMC-1 兔主动脉平滑肌细胞
PC-12(低分化) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）
PC-12(高分化) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（高分化）
PED 猪内皮细胞
Ramos [RA 1] 人B淋巴细胞瘤细胞
Reh 人急性非B非T淋巴细胞白血病
CHO/dhFr- [CHO-DXB11] 仓鼠卵巢细胞（二氢叶酸还原酶缺陷）
Mv.1.Lu [NBL-7; Mv1Lu] 貂肺上皮细胞
CV-1 非洲绿猴肾细胞
HAKATA@细胞资源库来源ATCC、DSMZ、 JCRB、 Lonza、 中科院、国家干细胞资源库等，前后引进千余多株细胞种子;坚持细胞来源真实可靠，细胞产品代数靠前，活力优佳，人源细胞提供权威机构的STR鉴定报告。
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