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技术资料/正文
SUP-B15细胞（ 人Ph+急淋白血病细胞系）培养时注意事项
866 人阅读发布时间：2020-05-14 14:52
SUP-B15细胞（ 人Ph+急淋白血病细胞系）
规格：1×10^6/瓶 或1ml冻存管
细胞来源：ATCC
培养条件：IMDM+20%FBS (货号：HN-FBS-500)
细胞特性：悬浮（淋巴母细胞样）
温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳
运输方式；复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输
SUP-B15细胞（ 人Ph+急淋白血病细胞系）传代：
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6；
3.传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
SUP-B15（ 人Ph+急淋白血病细胞系）冻存：无血清细胞冻存液（货号：H-W-100）
SUP-B15细胞（ 人Ph+急淋白血病细胞系）
注意事项：
1.该细胞对血清质量要求高，推荐使用HAKATA优等胎牛血清。
2.该细胞培养时需要添加0.05mM的β-巯基乙醇。
3.该细胞生长时，最高密度不能超过 2X 106 cells/mL. 传代时可以5 X 105 cells/mL的密度进行传代。
4.该细胞较难复苏，刚复苏时生长较慢，建议优先订购复苏好的细胞。而若是对冻存细胞进行复苏，冻存液融化后，应缓慢加入完全培养基，100-150g离心5min去除冻存液，并将T25培养瓶竖直放置直至细胞进入生长期，或者以1 X 106 cells/mL的密度先接种到24孔板进行培养。
5.该细胞培养时可能会有部分细胞聚团生长，若细胞团块过大过多，应当轻轻将其吹散。
HAKATA@细胞资源库来源ATCC、DSMZ、 JCRB、 Lonza、 中科院、国家干细胞资源库等，前后引进千余多株细胞种子;坚持细胞来源真实可靠，细胞产品代数靠前，活力优佳，人源细胞提供权威机构的STR鉴定报告。
如有需要，随时联系我们！www.chuanqiubio,com
规格：1×10^6/瓶 或1ml冻存管
细胞来源：ATCC
培养条件：IMDM+20%FBS (货号：HN-FBS-500)
细胞特性：悬浮（淋巴母细胞样）
温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳
运输方式；复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输
SUP-B15细胞（ 人Ph+急淋白血病细胞系）传代：
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6；
3.传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
SUP-B15（ 人Ph+急淋白血病细胞系）冻存：无血清细胞冻存液（货号：H-W-100）
SUP-B15细胞（ 人Ph+急淋白血病细胞系）
注意事项：
1.该细胞对血清质量要求高，推荐使用HAKATA优等胎牛血清。
2.该细胞培养时需要添加0.05mM的β-巯基乙醇。
3.该细胞生长时，最高密度不能超过 2X 106 cells/mL. 传代时可以5 X 105 cells/mL的密度进行传代。
4.该细胞较难复苏，刚复苏时生长较慢，建议优先订购复苏好的细胞。而若是对冻存细胞进行复苏，冻存液融化后，应缓慢加入完全培养基，100-150g离心5min去除冻存液，并将T25培养瓶竖直放置直至细胞进入生长期，或者以1 X 106 cells/mL的密度先接种到24孔板进行培养。
5.该细胞培养时可能会有部分细胞聚团生长，若细胞团块过大过多，应当轻轻将其吹散。
HAKATA@细胞资源库来源ATCC、DSMZ、 JCRB、 Lonza、 中科院、国家干细胞资源库等，前后引进千余多株细胞种子;坚持细胞来源真实可靠，细胞产品代数靠前，活力优佳，人源细胞提供权威机构的STR鉴定报告。
如有需要，随时联系我们！www.chuanqiubio,com