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技术资料/正文
MCF-10A细胞（人正常乳腺上皮细胞）培养时注意事项
8019 人阅读发布时间：2020-05-14 15:23
MCF-10A细胞（人正常乳腺上皮细胞）
规格：1×10^6/瓶 或1ml冻存管
细胞来源：ATCC
培养条件：DMEM/F12(1:1) 培养基+胰岛素(10ug/ml)+表皮生长因子(20ng/ml)+100ng/ml霍乱病毒+0.5ug/ml氢化可的松+5% 马血清 (货号：HM-FBS-500) 建议购买细胞对应完全培养基
细胞特性：贴壁（上皮细胞样）
温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳
运输方式；复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输
MCF-10A细胞（人正常乳腺上皮细胞）传代：
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6；
3.传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
MCF-10A细胞（人正常乳腺上皮细胞）冻存：无血清细胞冻存液（货号：H-W-100）
MCF-10A细胞（人正常乳腺上皮细胞）
注意事项：
1.该细胞推荐培养方法中包含100 ng/ml的霍乱毒素，国内的MCF-10A专用培养基均无该成分，因此会造成细胞贴壁很慢。
2.该细胞贴壁能力对培养基pH值比较敏感，应使用新鲜的完全培养基并在对应的CO2浓度下进行培养。
3.该细胞传代或复苏之后可能需要2天及以上才能完全贴壁，完全贴壁之前尽量少移动细胞，勿将悬浮细胞直接换掉，换液时也不要冲洗细胞。
4.若该细胞传代或复苏之后贴壁过慢，可添加10%优质FBS以促进贴壁。
HAKATA@细胞资源库来源ATCC、DSMZ、 JCRB、 Lonza、 中科院、国家干细胞资源库等，前后引进千余多株细胞种子;坚持细胞来源真实可靠，细胞产品代数靠前，活力优佳，人源细胞提供权威机构的STR鉴定报告。
查询更多细胞株信息，请登录官方网站 www.chuanqiubio,com
规格：1×10^6/瓶 或1ml冻存管
细胞来源：ATCC
培养条件：DMEM/F12(1:1) 培养基+胰岛素(10ug/ml)+表皮生长因子(20ng/ml)+100ng/ml霍乱病毒+0.5ug/ml氢化可的松+5% 马血清 (货号：HM-FBS-500) 建议购买细胞对应完全培养基
细胞特性：贴壁（上皮细胞样）
温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳
运输方式；复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输
MCF-10A细胞（人正常乳腺上皮细胞）传代：
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6；
3.传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
MCF-10A细胞（人正常乳腺上皮细胞）冻存：无血清细胞冻存液（货号：H-W-100）
MCF-10A细胞（人正常乳腺上皮细胞）
注意事项：
1.该细胞推荐培养方法中包含100 ng/ml的霍乱毒素，国内的MCF-10A专用培养基均无该成分，因此会造成细胞贴壁很慢。
2.该细胞贴壁能力对培养基pH值比较敏感，应使用新鲜的完全培养基并在对应的CO2浓度下进行培养。
3.该细胞传代或复苏之后可能需要2天及以上才能完全贴壁，完全贴壁之前尽量少移动细胞，勿将悬浮细胞直接换掉，换液时也不要冲洗细胞。
4.若该细胞传代或复苏之后贴壁过慢，可添加10%优质FBS以促进贴壁。
HAKATA@细胞资源库来源ATCC、DSMZ、 JCRB、 Lonza、 中科院、国家干细胞资源库等，前后引进千余多株细胞种子;坚持细胞来源真实可靠，细胞产品代数靠前，活力优佳，人源细胞提供权威机构的STR鉴定报告。
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