上海传秋生物科技有限公司
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技术资料/正文
NK92MI细胞(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)培养时注意事项
2243 人阅读发布时间:2020-05-14 16:59
NK92MI细胞(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
规格:1×10^6/瓶 或1ml冻存管
细胞来源:ATCC
培养条件:NK-92MI专用培养基
细胞特性:悬浮(淋巴母细胞样)
温度:37℃ 气相:95%空气,5%二氧化碳
运输方式;复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输
NK92MI细胞(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
传代:
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,传代比例为1:3到1:6;
3.传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
NK92MI细胞(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
冻存:无血清细胞冻存液(货号:H-W-100)
NK92MI细胞(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
注意事项:
1.该细胞对培养基质量要求高,建议使用新鲜的专用培养基。
2.推荐以2x10^5个/mL-1x10^6个/mL的密度培养细胞。
3.该细胞培养时聚团生长,分散的单个细胞活性会降低,若细胞团块过大过多,应当轻轻将其吹散成小细胞团。
4.该细胞的活性受离心影响较大。尽量少离心。复苏时,冻存液融化后,建议直接缓慢滴加10mL完全培养基,竖直放置T25瓶培养。每2天一次半量换液,将细胞悬液吸至15mL离心管,竖直静置2-3h,待细胞团基本都下沉之后,小心地吸取上半部培养基弃去,加入新鲜培养基。第一次传代时则需要弃去绝大部分培养基,可使用500r/min离心3min以使细胞团下沉再小心弃去绝大部分培养基。
HAKATA@细胞资源库来源ATCC、DSMZ、 JCRB、 Lonza、 中科院、国家干细胞资源库等,前后引进千余多株细胞种子;坚持细胞来源真实可靠,细胞产品代数靠前,活力优佳,人源细胞提供权威机构的STR鉴定报告。
查询更多细胞株信息,请登录官方网站 www.chuanqiubio,com
规格:1×10^6/瓶 或1ml冻存管
细胞来源:ATCC
培养条件:NK-92MI专用培养基
细胞特性:悬浮(淋巴母细胞样)
温度:37℃ 气相:95%空气,5%二氧化碳
运输方式;复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输
NK92MI细胞(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
传代:
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,传代比例为1:3到1:6;
3.传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
NK92MI细胞(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
冻存:无血清细胞冻存液(货号:H-W-100)
NK92MI细胞(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
注意事项:
1.该细胞对培养基质量要求高,建议使用新鲜的专用培养基。
2.推荐以2x10^5个/mL-1x10^6个/mL的密度培养细胞。
3.该细胞培养时聚团生长,分散的单个细胞活性会降低,若细胞团块过大过多,应当轻轻将其吹散成小细胞团。
4.该细胞的活性受离心影响较大。尽量少离心。复苏时,冻存液融化后,建议直接缓慢滴加10mL完全培养基,竖直放置T25瓶培养。每2天一次半量换液,将细胞悬液吸至15mL离心管,竖直静置2-3h,待细胞团基本都下沉之后,小心地吸取上半部培养基弃去,加入新鲜培养基。第一次传代时则需要弃去绝大部分培养基,可使用500r/min离心3min以使细胞团下沉再小心弃去绝大部分培养基。
HAKATA@细胞资源库来源ATCC、DSMZ、 JCRB、 Lonza、 中科院、国家干细胞资源库等,前后引进千余多株细胞种子;坚持细胞来源真实可靠,细胞产品代数靠前,活力优佳,人源细胞提供权威机构的STR鉴定报告。
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