上海传秋生物科技有限公司
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技术资料/正文
THP-1细胞( 人急性单核细胞白血病细胞)培养时注意事项
6290 人阅读发布时间:2020-05-14 17:31
THP-1细胞( 人急性单核细胞白血病细胞)
规格:1×10^6/瓶 或1ml冻存管
细胞来源:ATCC
培养条件:RPMI-1640+10% FBS+0.05mM 2-巯基乙醇(货号:HN-FBS-500)
细胞特性:悬浮(单核细胞样)
温度:37℃ 气相:95%空气,5%二氧化碳
运输方式;复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输
THP-1细胞( 人急性单核细胞白血病细胞)传代:
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,传代比例为1:3到1:6;
3.传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
THP-1细胞( 人急性单核细胞白血病细胞)冻存:无血清细胞冻存液(货号:H-W-100)
THP-1细胞( 人急性单核细胞白血病细胞)
注意事项:
1.该细胞对血清质量要求高,推荐使用HAKATA优等胎牛血清。
2.该细胞培养时需要添加0.05mM的β-巯基乙醇。
3.该细胞生长时,最高密度不能超过 1 X 106 cells/mL. 传代时可以2- 4 X 105 cells/mL的密度进行传代。
4.该细胞较难复苏,建议优先订购复苏好的细胞。而若是对冻存细胞进行复苏,冻存液融化后,应缓慢加入完全培养基,100-150g离心5min去除冻存液,并以20%血清浓度进行培养,并将T25培养瓶竖直放置直至细胞进入生长期。细胞状态正常之后,再恢复到10%的浓度。
5.该细胞培养时可能会有部分细胞聚团生长,若细胞团块过大过多,应当轻轻将其吹散。
HAKATA@细胞资源库来源ATCC、DSMZ、 JCRB、 Lonza、 中科院、国家干细胞资源库等,前后引进千余多株细胞种子;坚持细胞来源真实可靠,细胞产品代数靠前,活力优佳,人源细胞提供权威机构的STR鉴定报告。
查询更多细胞株信息,请登录官方网站 www.chuanqiubio,com
规格:1×10^6/瓶 或1ml冻存管
细胞来源:ATCC
培养条件:RPMI-1640+10% FBS+0.05mM 2-巯基乙醇(货号:HN-FBS-500)
细胞特性:悬浮(单核细胞样)
温度:37℃ 气相:95%空气,5%二氧化碳
运输方式;复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输
THP-1细胞( 人急性单核细胞白血病细胞)传代:
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,传代比例为1:3到1:6;
3.传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
THP-1细胞( 人急性单核细胞白血病细胞)冻存:无血清细胞冻存液(货号:H-W-100)
THP-1细胞( 人急性单核细胞白血病细胞)
注意事项:
1.该细胞对血清质量要求高,推荐使用HAKATA优等胎牛血清。
2.该细胞培养时需要添加0.05mM的β-巯基乙醇。
3.该细胞生长时,最高密度不能超过 1 X 106 cells/mL. 传代时可以2- 4 X 105 cells/mL的密度进行传代。
4.该细胞较难复苏,建议优先订购复苏好的细胞。而若是对冻存细胞进行复苏,冻存液融化后,应缓慢加入完全培养基,100-150g离心5min去除冻存液,并以20%血清浓度进行培养,并将T25培养瓶竖直放置直至细胞进入生长期。细胞状态正常之后,再恢复到10%的浓度。
5.该细胞培养时可能会有部分细胞聚团生长,若细胞团块过大过多,应当轻轻将其吹散。
HAKATA@细胞资源库来源ATCC、DSMZ、 JCRB、 Lonza、 中科院、国家干细胞资源库等,前后引进千余多株细胞种子;坚持细胞来源真实可靠,细胞产品代数靠前,活力优佳,人源细胞提供权威机构的STR鉴定报告。
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