ZR-75-1细胞(人乳腺癌细胞)培养时注意事项
992 人阅读发布时间:2020-05-14 17:38
ZR-75-1细胞(人乳腺癌细胞)
规格:1×10^6/瓶 或1ml冻存管
细胞来源:ATCC
培养条件:RPMI-1640+10% FBS(货号:HN-FBS-500)
细胞特性:贴壁(上皮细胞样)
温度:37℃ 气相:95%空气,5%二氧化碳
运输方式;复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输
ZR-75-1细胞(人乳腺癌细胞)传代:
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,传代比例为1:3到1:6;
3.传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
ZR-75-1细胞(人乳腺癌细胞)冻存:无血清细胞冻存液(货号:H-W-100)
ZR-75-1细胞(人乳腺癌细胞)
注意事项:
1.该细胞生长缓慢,且对血清质量要求高,推荐使用HAKATA优等胎牛血清。
2.细胞不形成融合单层,仅轻轻附着在基质上。
3.消化时间较长,通常在5-15分钟。消化时不要通过敲击或摇晃烧瓶来搅动细胞,以免形成细胞团。
4.传代之后,细胞需要较长时间才能贴壁,尽量少移动细胞。
HAKATA@细胞资源库来源ATCC、DSMZ、 JCRB、 Lonza、 中科院、国家干细胞资源库等,前后引进千余多株细胞种子;坚持细胞来源真实可靠,细胞产品代数靠前,活力优佳,人源细胞提供权威机构的STR鉴定报告。
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