293T人胚肾细胞 培养时注意事项

293T人胚肾细胞

细胞来源：ATCC
培养条件：HAKATA 细胞完全培养基 或 DMEM+10% FBS+1%NEAA+1%谷氨酰胺（Cat#HN-FBS-500）
细胞特性：贴壁（上皮细胞样）
温度：37℃     气相：95%空气，5%二氧化碳
运输方式；复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输

293T人胚肾细胞传代：

1. 细胞密度达 80% ~ 90%以上，可以进行传代，传代比例为 1:2~1:5。
2. 弃去原培养基，加入 3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。
3. 加入 1~2mL 消化液，置于 37°C 孵育消化。 （第一次消化时常取出于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞 脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化）
4. 消化好后加入 3ml 完全培养基，将悬液轻轻打匀后转移至 15mL 离心管。
5. 1200rpm 离心 3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代

293T人胚肾细胞冻存：

细胞冻存步骤以 HAKATA 无血清细胞冻存液为例：
1. 细胞冻存时，弃去原培养基，加入 2mL PBS，润洗后去除。
2. 加入 1mL 0.25%胰酶-EDTA 消化液，置于 37°C 孵育，细胞皱缩变圆开始脱落时终止消化， 加入 3mL 完全培养基。
3. 将悬液轻轻吹匀后转移至 15mL 离心管，1200r/min 离心 3min。
4. 去上清，按大约 1*10^6 个细胞/mL 加入预冷 4℃的无血清冻存液。
5. 吹打均匀，每支冻存管冻存 1mL 细胞液，注意冻存管做好标识。
6. 将冻存管置于-80℃冰箱，过夜后转移至液氮中保存。

293T人胚肾细胞注意事项：

1. 本产品仅限用于科学研究，不可用于人和动物的活体诊断治疗。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作。
3. 充液培养基血清浓度为 2%，请勿使用原瓶培养基培养，需更换新鲜培养

HAKATA@细胞资源库来源ATCC、DSMZ、 JCRB、 Lonza、 中科院、国家干细胞资源库等，前后引进千余多株细胞种子;坚持细胞来源真实可靠，细胞产品代数靠前，活力优佳，人源细胞提供权威机构的STR鉴定报告。

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