关于血清的小知识

 

血清的颜色为什么不一样？

血清中为何会有沉淀？

如何除去血清中的沉淀？

血清如何存储和解冻？

 

收到血清时需要做的

1. 验收

查看血清包装是否完好，是否有漏液破损情况，如有破损需售后处理。

 

2. 血清有部分融化了，该怎么办？

运输过程中干冰挥发，可能导致血清部分融化，此时让血清完全解冻，轻轻摇动血清瓶，然后重新冻结血清，血清的质量不会受到影响。

 

怎么解冻血清

1. 将冻存的血清移到 2-8℃ 的冰箱中，过夜处理；

2. 将血清移至 37℃ 水浴中，间歇性摇晃混匀底部的溶解物，直至全部溶解。

 

注意：

① 温和的升温过程可有效减少沉淀的产生，不推荐直接高温解冻血清；

② 解冻之后的血清不要长时间放置在 37℃ 下；

③ 若血清没有混匀且放置于高于 40℃ 的水浴中，底部的蛋白会变性形成沉淀；

④ 在解冻过程中，需不断的摇晃混合以阻止形成梯度及沉淀；

⑤ 在解冻或长时间储存之后，血清中会出现浑浊物和絮状物；

⑥ 反复冻融会造成血清的沉淀增多，给后续处理带来麻烦，我们建议血清的解冻/冻存次数越少越好。

血清的颜色为什么不一样

胎牛血清颜色是由血红蛋白（鲜红）和胆红素（黄）决定的，主要是受血红蛋白影响。血红蛋白含量很低时，含少量胆红素，呈淡黄或金黄，血红蛋白含量高时，会呈现淡红色。

血清的颜色取决于血红蛋白浓度，不同批次的血清血红蛋白含量不一样，该参数的变化不会影响血清性能。

 

 

为什么血清里边有沉淀物

血清中沉淀主要有：纤维蛋白（絮状沉淀），胎球蛋白，脂蛋白，冷凝集素，玻连蛋白，磷酸钙（显微镜下小黑点沉淀），胆固醇等。

1.造成沉淀的主要原因

 

• 血清热灭活；

• 37℃ 孵育；

• 频繁的解冻与冻存操作；

• 解冻过程中未混合；

• 经 γ-辐照；

• 2-8℃ 长时间储存；

• 在自动解冻的冰箱中储存。

 

 

少量的沉淀是血清解冻过程中的正常现象，过于澄清的血清并不代表更高的品质，也可能是「预老化」（加工过程中反复冻融尽可能的去除纤维蛋白原）的结果。虽然血清中的沉淀很难预测和阻止，但合理正确的储存和使用方法可以降低血清中沉淀的析出，同时也可采取简单的方式去除沉淀物。

 

2. 去除沉淀的方法

如果血清中含有大量的沉淀，我们不建议直接过滤血清。若去除这些絮状沉淀物，可将血清分装至无菌离心管中，以 400 g 稍微离心，上清液直接加入培养基内一起过滤。

 

血清是否需要热灭活    

如果培养的细胞用于免疫学试验；培养ES细胞、平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。

 

如有灭活血清的需要，可在56ºC的水浴中进行30分钟的血清热灭活，或选购经热灭活处理的胎牛血清。

 

血清的储存方法及注意事项

建议将血清储存在 -20℃ 条件下。

 

血清虽然可以在-80°C下储存，但是我们不建议在该条件下储存，一是在-80°C条件下存储有包装瓶破裂的风险，另一方面解冻时巨大的温度变化会导致产生更多的沉淀。

血清一旦解冻，可在2-8℃ 条件下储存 6 周。如果解冻之后的血清储存时间需要大于 6 周，建议分装成合适的体积并重新冻存。