细胞生长缓慢的常见原因:

(1) 培养基可能缺乏细胞生长所需的某种因子。
通常情况下，当小伙伴购买细胞，并没有按照 ATCC 或国内细胞库推荐的方法制备培养基，使用实验室兄弟姐妹使用的培养基来培养细胞。解决方法一般是按照推荐的方法制备培养基，或直接购买培养细胞的培养基。

(2) 细菌、支原体、真菌等污染。
虽然培养基中通常添加双抗体 (青霉素和链霉素)，但如果无菌操作观念不强，仍有可能造成污染。处理方法: 如果有冷冻细胞，可以丢弃污染细胞。当然，丢弃并不是随意的，扔进垃圾桶。应按照实验室生物安全规定进行。然后复苏培养物，建议培养箱完全消毒。

如果不冷冻，而且这种细胞非常珍贵，常用的治疗方法是药物治疗: 细菌污染加 5-10 倍的抗生素; 真菌污染加抗真菌药物; 支原体污染再加上抗支原体药物，具体药物可以咨询技术支持，他们会更加专业。

(3) 许多细胞的生长依赖于密度。
如果传代后细胞密度过小，也会影响细胞生长。这段时间没有什么特别好的，就是更换液体。如果细胞培养瓶为 T75，则可以消化、离心、复苏，然后接种到 T25 瓶中。

(4) 冷冻细胞中添加 DMSO(二甲基亚砜) 的量不正确，没有逐渐梯度冷却。
下一次恢复后的细胞总是坏的。处理方法: 按推荐的冷冻保存方法制备冷冻液。部分细胞适合 10% DMSO，部分细胞适合 5% DMSO; 严格遵循渐变冷却的原则，细胞恢复后迅速解冻。

(5) 换液间隔时间太长。
一些小伙伴真的把细胞「佛」系生长。当他们想到它的时候，才会换下液体，相信一个句子。「你已经是一个成熟的细胞了。你应该学会养活自己，成长」。在这种情况下，细胞培养瓶中积累了大量的细胞代谢废物，影响细胞活性。推荐: 勤奋点

(6)  细胞的「消化」时间不宜过长，减少对细胞的损伤。
此外，EDTA 一般添加到胰腺酶中，螯合钙离子，影响细胞粘附。治疗方法: 控制细胞「消化」时间，尽量去除干净的胰蛋白酶和 EDTA。

(7）PH 值。
细胞需要在一定的 PH 值下生长，这个小朋友知道。但是很多时候 PH 值是我们忽略的东西，这也是想强调的一点。随着使用时间的增加，我们使用的介质可能会慢慢变成碱性 !(当然，它也可能变酸，但改变碱是常见的)。一般来说，过碱的培养基会影响细胞的生长。治疗: 简单的方法就是更换新鲜的培养基 ! 当然，如果你有时间和条件，你可以调整介质的 pH 值。