由于Na₂HPO ₄ 和KH₂PO ₄ 它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广；而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl₂和0.5 mmol/L MgCl₂，以提供双价阳离子。

pbs缓冲液的配制方法
含0.05%吐温－20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS－T)配制方法为：
称取磷酸/二氢钾(KH2PO4)，磷酸/氢二钠(Na2HPO4·12H2O)，氯/化钠(NaCl)，氯/化jia(KCl)，吐温－20 ，加水。
PBS:Phosphate Buffered Saline
PBS 1L配方pH7.4：磷酸/二氢钾(KH2PO4)：0.27g，
磷酸/氢二钠(Na2HPO4)：1.42g，
氯/化钠(NaCl)：8g，
氯/化jia(KCl)0.2g，
加去离子水约800mL充分搅拌溶解，然后加入浓盐酸调pH至7.4，最后定容到1L

pbs缓冲液的作用

PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称，不仅伪狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。

原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用，蒸馏水不具有盐平衡作用，可以破坏生物蛋白的结构及生物特性；生理盐水不具有调整pH的作用，对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应，所以使用PBS是首/选。

PBS也不是通用的，有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高，就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分，维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。