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细胞培养为什么要先裂解红细胞?

人阅读 发布时间:2022-12-13 10:31

红细胞裂解液

一、基本介绍

红细胞裂解液是一种去除红细胞最简便易行的方法,即用裂解液裂解红细胞,它 既不损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除 方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化以及组织细 胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不 含红细胞,可进一步用于原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸与蛋白的分离和 提取等。

二、使用说明

①组织细胞样品

1、新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液。

2、从4℃冰箱中取出 ELS裂解液,按 1:3-5 的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml 细胞压积加入 3-5ml裂解液),轻轻吹打混匀。

3、 800-1000rpm离心 5-8 分钟,离心弃去上层红色清液。

4、收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗 2-3 次。

5、如裂解不完全可重复步骤2和3。

6、重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,最好是于步骤4开始使用DEPC水配制 的溶液中进行

红细胞的生命周期非常短,一般只有120天,但是他繁殖的血特别快,用他的话就会特别的能体现细胞的分裂,然后他是所有细胞中分裂最快的所以这个细胞他是非常的有有价值的,所以对于细胞培养他非常的有用。就是它的构造非常简单,里面没有任何的细胞器,只有细胞膜跟蛋白质。

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