COLO205细胞 (人结肠癌细胞),培养注意事项
2310 人阅读发布时间:2020-05-14 14:32
COLO205细胞 人结肠癌细胞
规格:1×10^6/瓶 或1ml冻存管
细胞来源:ATCC
培养条件:RPMI-1640+10% FBS (货号:HN-FBS-500)
温度:37℃ 气相:95%空气,5%二氧化碳
运输方式;复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输
COLO205细胞 人结肠癌细胞 传代:
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,传代比例为1:3到1:6;
3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
COLO205细胞 人结肠癌细胞 冻存:无血清细胞冻存液(货号:H-W-100)
COLO205细胞 人结肠癌细胞,注意事项:
1.该细胞为半悬浮细胞。部分细胞轻微贴壁,大部分细胞悬浮。
2.悬浮细胞的密度建议维持在 3-9x105 cells/mL。
3.传代时先将贴壁细胞吹打下来,吹打不下来的细胞可用胰酶消化。以1:2至1:6的比例进行传代。
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